Experiment PCR and gel elecrophoresis

A       IDENTITAS

          Hari/Tanggal    : Senin / 9 Juli 2012

          Waktu               : 14.30-17.30

B       KEGIATAN                  

          Experiment PCR and gel elecrophoresis

C       RINGKASAN KEGIATAN

          Selama eksperiment kami dipandu oleh asisten Prof. Wenbio Shen yaitu Yanzie Xie. Sampel yanng digunakan dalam praktikum ini adalah DNA dari tanaman Arabidopsis thaliana. Peralatan yang dibutuhkan selama praktikum antara lain: mikropipet, tabung efendrop, alat PCR and elektroforesis. Adapun langkah kerjanya sebagai berikut:

·      Ambil tube yang berlabel A1, A2, B, C, dan D. Kemudian ambil masing-masing cairan dari tube-tube tersebut untuk dimix ke dalam tube lain. Masing-masing volume solution yang diambil dari tube sebagai berikut:

A1=0,1 ul, A2=0,1 ul, B=1 ul, C=8,8 ul, dan D=10 ul

·      Mix semua solution ke dalam tube baru (0,2 ml microtube)

                                                                   Volume (μl)  

Ø 2×PCR Mixture                                   10 (D)

Ø ddH₂O (double distilled water)            8.8 (C)

Ø Templates                                              1 (B)

Ø Primers(forward+reverse)                      0.1+0.1(A1+A2)

Ø Total                                                      20

·      Kemudian di PCR sebanyak 30 cycle

Ø 95 °C for 5 min;

Ø 95 C for 30s

Ø 54 C for 30s                                    30 Cycles

Ø 72 C for 30s

Ø 72 C for 10 min

Ø The end

Verifikasi hasil PCR dengan elektroforesis / melihat DNA running